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提供ACTH放免試劑盒,ACTH放免實(shí)驗(yàn)檢測(cè)

更新時(shí)間:2019-03-04      瀏覽次數(shù):2112

提供ACTH放免試劑盒,ACTH放免實(shí)驗(yàn)檢測(cè)

ACTH是由垂體前葉細(xì)胞分泌的39個(gè)氨基酸組成的直鏈多肽,分子量4500,在循環(huán)中的半衰期僅為10~25min。ACTH的生理作用為促進(jìn)腎上腺皮質(zhì)增生、合成和分泌皮質(zhì)類固醇,同時(shí)也促時(shí)腎上腺素、生長(zhǎng)激素合成。ACTH的合成和分泌受下丘腦促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)、腎上腺皮質(zhì)激素以及加壓素的調(diào)節(jié)。我們利用ACTH的18~39片段的特異抗體,建立了特異、靈敏的測(cè)定血漿、體液中ACTH18-39片段的放射免疫分析方法。該抗體也能同組織、細(xì)胞切片中特異的ACTH和體外純化的ACTH特異結(jié)合,用于研究組織化學(xué)診斷ACTH水平變化。因此該方法適用于腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)、異位ACTH綜合征、腎上腺腺瘤上腺皮質(zhì)功能減退等諸多研究疾病時(shí)血漿ACTH水平的監(jiān)測(cè)。 

標(biāo)準(zhǔn)ACTH 溶液:使用前用緩沖液1ml溶解,混勻。2~8℃避光保存,在標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定,濃度分別為0、5、15、45、135、405pg/ml。

125I- ACTH溶液:使用前用緩沖液(100管10.5ml溶解,50管5.5ml

溶解),混勻。如一次加樣超過(guò)100管,兩瓶混合后使用;2~8℃避光保存標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。

 

兔抗-ACTH  抗血清:使用前用緩沖液(100管10.5ml溶解,50管5.5ml

溶解),混勻。如一次加樣超過(guò)100管,兩瓶混合后使用;2~8℃避光保存標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。

 

驢抗兔免疫分離試劑:1瓶,液體,2~8℃保存,在標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。加樣前必須搖勻!

 

取靜脈血2ml,注入含10%EDTA二鈉30ul的試管中,混勻4℃,3000rpm離心10 min,分離血漿,待測(cè);如不立即測(cè)量,可將樣本密封后,置于2~8℃或-20℃儲(chǔ)存?zhèn)錅y(cè),2~8℃保存不應(yīng)超過(guò)48小時(shí),-20℃保存不超過(guò)2個(gè)月。冰凍樣品測(cè)定前,

2.手工作圖或計(jì)算器處理:

1).百分結(jié)合率計(jì)算:設(shè)S0管計(jì)數(shù)為B0,各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B,非特異管計(jì)數(shù)為NSB,則百分結(jié)合率計(jì)算公式如下:B/ B0=(B-NSB)/( B0-NSB)×100%

2).logit計(jì)算:各標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)或樣品管的logit值計(jì)算公式如下:

    logit=ln(B/ B0)/(1-B/ B0)

3)手工作圖:以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的B/B0為縱坐標(biāo)在logit-log坐標(biāo)紙上畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線(理想化時(shí)是一條直線)。根據(jù)待測(cè)樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標(biāo)紙,查出的數(shù)值應(yīng)取反對(duì)數(shù)才是后的濃度值。

4).計(jì)算器處理;使用有線性擬合功能的計(jì)算器,可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值,具體操作方法請(qǐng)查閱計(jì)算器的使用說(shuō)明書。

本測(cè)定盒主要技術(shù)指標(biāo)

1.標(biāo)準(zhǔn)范圍:5—405pg/ml

2.靈敏度:<5pg/ml

3.批內(nèi)變異系數(shù)(CV):<10%;

 批間變異系數(shù)(CV):<15%

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