小鼠骨橋素(OPN)elisa試劑盒基本信息

1979年Senger等報道一種與惡性轉化有關的一種包含RGD(精-甘-門冬氨酸)整合素結合區(qū)的磷酸化糖蛋白與腫瘤的關系,稱之為轉化相關性磷酸蛋白。后來Franzen等從骨組織中分離出一種磷酸蛋白,其特性與Senger等發(fā)現的磷酸蛋白相似,因其是細胞在骨基質中的產物，并能在細胞與基質中的礦質形成一種橋連，人們將其命名為OPN。OPNzui早發(fā)現于骨基質和牙齒中，后來一些學者在腎、內耳、蛻膜、胎盤、平滑肌、被激活的T細胞、巨噬細胞等不同的組織細胞中也發(fā)現了OPN，因此OPN也曾被稱為44kD骨酸蛋白、PP69、骨延蛋白1、尿蛋白，早期T淋巴細胞活性1(Eta-1)、分泌的磷蛋白1SPP-1)、骨唾液酸蛋白1(BSP-1)、44 kD骨磷蛋白和2αR。自1986年以來,相繼克隆了大鼠OPN、人OPN、小鼠OPN、豬OPN、牛OPN、雞OPN和兔OPNcDNA。近年來,OPN作為一種新型的細胞因子,在早期細胞免疫應答、肉芽腫炎癥、腫瘤發(fā)生及轉移中的作用倍受關注。（提示：以下敘述中均以OPN代替骨橋蛋白。）

小鼠骨橋素(OPN)elisa試劑盒操作注意事項

收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后當天就進行檢測的標本，及時儲存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集標本，請造模取材后，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實驗質量，所以避免反復凍融。

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入 10 ％（ v/v ）抗凝劑( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后，離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集上清。如有沉淀形 成，應再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

購買我司elisa試劑盒可以提供免費代測服務，客戶準備好樣本，上海和南京地區(qū)的客戶可以提供免費上門取樣服務。其他地區(qū)的客戶，樣本用泡沫箱子包好，放干冰或者冰袋寄送給我們。代測時間為5到7個工作日提供原始數據，分析數據， 實驗操作步驟以及實驗所用儀器。